你知道什么是多肽的純度么?今天就讓我們一起來了解一下吧。
多肽的純度是指HPLC方法在214nm處檢測到的目標(biāo)多肽的含量(214nm是肽鏈的吸收波長),紫外分光光度計檢測不到水和殘留的鹽不。
可發(fā)現(xiàn)其他的雜質(zhì)包括:缺失序列(缺失了一個或多個氨基酸殘基的靶序列),截斷序列(加帽過程中產(chǎn)生的序列)(專肽生物)脫保護(hù)不*序列(產(chǎn)生于整個合成過程或最后的裂解過程)。
多肽純化不涉及水和鹽。HPLC純化會產(chǎn)生少量的TFA,如:游離的氨基末端和其他側(cè)鏈如Arg、Lys、His都可生成少量TFA雜質(zhì)。
通常交付的多肽多含有微量TFA和殘留水。即使處于凍干狀態(tài),水也會因共價結(jié)合的能力不同而不同程度地存在著。
肽凈含量不同于多肽純度。肽凈含量是指與非肽物質(zhì)(主要為抗衡離子和水)相比的多肽量??赏ㄟ^氨基酸分析來確定肽凈含量。通常,親水性多肽即使在嚴(yán)格的凍干狀態(tài)下,也會吸收微量的水。因純化和凍干工藝,會導(dǎo)致不同批次的肽凈含量有所不同。
在多肽中還存在哪些其他物質(zhì)(雜質(zhì))?
純化前的多肽中包含的雜質(zhì)包括多肽和非多肽物質(zhì), 純化后的多肽中包含的雜質(zhì)除了TFA鹽,大多數(shù)為序列被修改的多肽。
1.缺失了一個或多個氨基酸殘基的靶序列
2.為避免缺失序列的產(chǎn)生而進(jìn)行的加帽操作,截斷序列即產(chǎn)生于加帽過程中
3.產(chǎn)生于整個合成過程或最后的裂解過程
4.保護(hù)基重新附著在多肽的其他位置
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