在多肽合成儀中,在線檢測(cè)耦合效果的裝置,如UV Monitor往往是選配裝置,客戶可根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要選購(gòu)。其功能是讓操作者直觀的看到多肽合成的每一部氨基酸偶聯(lián)效果,從而針對(duì)特定的序列做合成設(shè)置的調(diào)整,最終達(dá)到最佳合成效果。
對(duì)于不熟悉多肽合成儀操作的用戶來(lái)說(shuō),UV Monitor是相當(dāng)重要的。
試劑檢測(cè):沒有選購(gòu)在線檢測(cè)附件的多肽合成儀用戶,也可以采用試劑檢測(cè)方法做基本的耦合效果測(cè)定實(shí)驗(yàn)。
固相多肽合成中,主要是通過(guò)檢測(cè)樹脂上游離氨基來(lái)判斷連接效率,檢測(cè)方法稱為Kaiser方法,其檢測(cè)結(jié)果,如果有游離氨基的時(shí)候,顯示蘭色,或紅褐色(pro,ser,His)。
Kaiser試劑包括:A,6% 茚三酮的乙醇溶液;B,80% 苯酚的乙醇溶液;C,2% 0.001M KCN的吡啶溶液。
配制中的吡啶需要經(jīng)過(guò)茚三酮處理后,重蒸后再使用。檢測(cè)過(guò)程,取少量樹脂,加入A,B,C各2-3滴,100℃下加熱1-2min,如果溶液有蘭色,或樹脂出現(xiàn)蘭色,紅褐色,表明還有游離氨基,否則說(shuō)明連接*。
其它檢測(cè)游離氨基的方法:三硝基苯磺酸法,溴芬蘭法等。